昆虫elisa检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被昆虫捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的昆虫呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
3、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。
6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
昆虫elisa检测试剂盒的注意事项：
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
2、各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
3、请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5、底物请避光保存。
6、严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
7、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8、本试剂不同批号组分不得混用。
10、如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
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